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當(dāng)前位置:首頁(yè)  >  技術(shù)文章  >  賽默飛液相色譜U3000/DGLC/Vanquish使用問題

賽默飛液相色譜U3000/DGLC/Vanquish使用問題

更新時(shí)間:2023-06-26      點(diǎn)擊次數(shù):6866

問題描述

可能原因

解決方案

軟件問題

提示后密封清洗液用完,添加后密封清洗液后仍然報(bào)錯(cuò)

重新啟動(dòng)蠕動(dòng)泵:進(jìn)入泵界面—More Options—將Rear Seal Wash的模式由Idle改為Active,點(diǎn)擊enter即可

柱溫箱溫度已達(dá)到規(guī)定范圍,但仍顯示未就緒

柱溫箱的平衡時(shí)間設(shè)置過長(zhǎng),可在儀器方法中修改

如何查看紫外燈能量

VWD:打開UV界面的“Wellness"選項(xiàng)即可查看燈壽命和使用時(shí)間;DAD:打開UV界面的“Wellness"選項(xiàng)可查看燈的使用時(shí)間,在Startup界面可查看燈能量

如何設(shè)置序列或者進(jìn)樣完成后自動(dòng)打印/導(dǎo)出報(bào)告

在Queue界面的“Report setup"項(xiàng)下進(jìn)行設(shè)置

峰面積較小的色譜峰無法自動(dòng)積分

在Cobra向?qū)е性O(shè)置合適的基線噪聲范圍、Cobra平滑寬度和小峰面積

如何去掉報(bào)告中的變色龍水印

打開管理控制臺(tái)——全局策略——水印,將“打印水印"的勾去掉即可

Vanquish自動(dòng)進(jìn)樣器無法自動(dòng)識(shí)別樣品盤類型

1)齒輪松動(dòng),聯(lián)系工程師;2)樣品盤上的二維碼損壞或有液滴;3)正確放置樣品盤,使A1號(hào)位在左后方

Vanquish自動(dòng)進(jìn)樣器無法正常進(jìn)樣

重新關(guān)好自動(dòng)進(jìn)樣器的門

Vanquish自動(dòng)進(jìn)樣器是否需要校正針位

不需要

壓力升高

色譜條件發(fā)生改變(如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化)

比較相同條件下壓力的變化趨勢(shì),若壓力升高,再按照下述原因進(jìn)行排查

保護(hù)柱的柱芯污染

更換新的柱芯

進(jìn)樣閥load狀態(tài)壓力正常,切至inject狀態(tài)時(shí)壓力升高,可能是六通閥或進(jìn)樣針堵塞

超聲進(jìn)樣針/六通閥的定子和轉(zhuǎn)子,若無效則更換

靜態(tài)混合器堵塞

反沖靜態(tài)混合器,無效則更換。平常操作時(shí):流動(dòng)相的純度需要滿足分析檢測(cè)的要求、檢測(cè)泵內(nèi)密封圈的密封性

針座密封堵塞

對(duì)針座密封超聲清洗

色譜柱填料塌陷引起流通池堵塞

反沖流通池(注意壓力:DAD/VWD耐壓120bar;FLD耐壓20bar),無效則聯(lián)系工程師

壓力傳感線接觸不良

重新拔插壓力傳感線。平常操作時(shí)注意不要觸摸到壓力傳感線接頭

新色譜柱壓力逐漸升高

新色譜柱的填料在流動(dòng)相作用下逐漸壓實(shí),柱壓會(huì)逐漸升高,但使用一段時(shí)間后,相同條件下壓力會(huì)趨于穩(wěn)定

色譜柱污染

按照色譜柱說明書進(jìn)行沖洗和在生,無效則更換

CAD的噴針堵塞

取出噴針進(jìn)行超聲清洗(注意針尖不要和瓶底接觸)。建議檢測(cè)器入口安裝不銹鋼過濾器,阻止柱填料流失

排氣泡時(shí)未擰松purge閥

排氣泡前逆時(shí)針擰松1.5~2圈

柱前預(yù)熱或者柱后冷卻器堵塞

反沖,需要時(shí)更換

壓力ZUI高限設(shè)置不合適引起壓力超限

根據(jù)色譜柱和儀器耐受的壓力范圍設(shè)置合適的限值

樣品/緩沖鹽析出引起管路堵塞

先采用可溶性的溶劑沖洗流路。平常操作時(shí):若流動(dòng)相含有緩沖鹽,建議色譜柱先沖洗大比例水再采用初始流動(dòng)相平衡;為避免樣品在流動(dòng)相中析出,建議采用初始流動(dòng)相溶解樣品

壓力降低

色譜條件發(fā)生改變(如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化)

比較相同條件下壓力的變化趨勢(shì),若壓力降低,再按照下述原因進(jìn)行排查

管路沒有擰緊導(dǎo)致溶液泄露

重新擰緊泄露處的管路

流動(dòng)相走空

加入流動(dòng)相并重新排氣泡。建議在儀器方法中設(shè)置合適的壓力低限

系統(tǒng)流路中含有大量氣泡

重新對(duì)流動(dòng)相排氣泡,待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

過濾頭堵塞:某通道溶液無法抽出,取下過濾頭后恢復(fù)正常

超聲清洗過濾頭,無效則更換

單向閥堵塞:所有通道的溶液均無法抽出

超聲清洗單向閥,無效則更換

脫氣機(jī)管路堵塞:某通道溶液無法抽出,短接脫氣機(jī)后恢復(fù)正常

沖洗脫氣機(jī)管路。平常操作時(shí)建議每周采用甲醇清洗脫氣機(jī)管路,尤其水相通道

比例閥損壞:某通道溶液無法正常抽出,更換比例閥接口后恢復(fù)正常

聯(lián)系工程師

針座密封發(fā)生漏液

更換針座密封

排氣后忘記關(guān)閉Purge閥

流動(dòng)相排完氣泡后及時(shí)擰緊purge閥,但不需要擰得過緊

purge閥密封性變差

更換新的purge閥

壓力傳感線接觸不良

重新拔插壓力傳感線。平常操作時(shí)注意不要觸摸到壓力傳感線接頭

進(jìn)樣時(shí)吸入空氣

1)設(shè)置合適的進(jìn)樣高度;2)樣品量太少時(shí)可加襯管

進(jìn)樣瞬間壓力下降,后又恢復(fù)正常

U3000:正?,F(xiàn)象,吸入的樣品溶液沒有經(jīng)過預(yù)壓縮,為常壓狀態(tài),高壓的流動(dòng)相與常壓樣品接觸時(shí)會(huì)引起壓力下降;Vanquish:不會(huì)出現(xiàn)該情況

轉(zhuǎn)子發(fā)生磨損,導(dǎo)致部分流動(dòng)相及樣品溶液直接排廢

更換轉(zhuǎn)子

單向閥裝反

重裝單向閥

壓力波動(dòng)

流動(dòng)相含有氣泡(一般呈規(guī)律的鋸齒狀波動(dòng))

重新對(duì)流動(dòng)相排氣泡,待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

過濾頭部分堵塞;流動(dòng)相瓶及低壓區(qū)輸液管路被菌類或藻類污染

超聲清洗過濾頭和流動(dòng)相瓶,沖洗低壓區(qū)輸液管路。平常操作時(shí)建議每周采用甲醇清洗脫氣機(jī)管路,尤其水相通道

單向閥部分堵塞

超聲清洗單向閥,無效則更換。平常操作時(shí):建議儀器不要長(zhǎng)期保存在純乙腈中;若流動(dòng)相中緩沖鹽濃度過高可增加泵前溶液的混合體積

輸液泵的密封圈發(fā)生泄漏

更換輸液泵的柱塞桿或密封圈

流動(dòng)相混合不均勻

1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

進(jìn)樣后壓力不穩(wěn)定,且保留時(shí)間重現(xiàn)性不佳

在儀器方法的自動(dòng)進(jìn)樣器界面設(shè)置與泵同步

脫氣盒損壞

聯(lián)系工程師。平常操作時(shí),建議:1)所有流動(dòng)相的過濾頭均置于液面以下,減少真空泵的工作負(fù)荷;2)使用正相溶劑時(shí)短接脫氣機(jī)

比例閥損壞

聯(lián)系工程師

計(jì)量泵裝置密封圈發(fā)生泄漏

更換計(jì)量泵的柱塞桿或密封圈

保留時(shí)間前移

色譜條件發(fā)生改變(如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化)

比較相同條件下保留時(shí)間的變化趨勢(shì),若前移,再按照以下原因進(jìn)行排查

流動(dòng)相混合不均勻

1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

色譜柱未充分平衡

延長(zhǎng)系統(tǒng)的平衡時(shí)間,尤其當(dāng)流動(dòng)相中含有離子對(duì)試劑時(shí)

色譜柱污染

表面活性劑污染時(shí)該現(xiàn)象尤為明顯,根據(jù)色譜柱的說明書進(jìn)行沖洗,需要時(shí)更換色譜柱

固定相塌陷

更換色譜柱。平常操作時(shí):在色譜柱規(guī)定范圍內(nèi)進(jìn)行使用

緩沖鹽吸潮導(dǎo)致配置的濃度過低

將易潮解的鹽置于干燥器中保存

保留時(shí)間后移

色譜條件發(fā)生改變(如柱溫、流速、有機(jī)相種類等發(fā)生變化)

比較相同條件下保留時(shí)間的變化趨勢(shì),若后移,再按照以下原因進(jìn)行排查

流動(dòng)相混合不均勻

1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

轉(zhuǎn)子發(fā)生磨損,導(dǎo)致部分流動(dòng)相及樣品溶液直接排廢

更換轉(zhuǎn)子

色譜柱未充分平衡

延長(zhǎng)系統(tǒng)的平衡時(shí)間,尤其當(dāng)流動(dòng)相中含有離子對(duì)試劑時(shí)

系統(tǒng)流路含有氣泡

重新對(duì)流動(dòng)相排氣泡,待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

流動(dòng)相組成發(fā)生變化

對(duì)于提前混合好的流動(dòng)相,注意置于陰涼處密封保存

比例閥故障

聯(lián)系工程師

柱外死體積增加

更換內(nèi)徑更小、更短的管路進(jìn)行連接

保留時(shí)間不穩(wěn)定

單向閥堵塞

超聲清洗單向閥,無效則更換

平衡時(shí)間不足

延長(zhǎng)系統(tǒng)的平衡時(shí)間,尤其當(dāng)流動(dòng)相中含有離子對(duì)試劑時(shí)

流動(dòng)相混合不均勻

1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

比例閥故障

聯(lián)系工程師

未設(shè)置柱溫

在儀器方法中設(shè)置合適的柱溫

系統(tǒng)流路含有氣泡

重新對(duì)流動(dòng)相排氣泡,待基線和壓力穩(wěn)定后再進(jìn)樣

前延峰

分離不佳,大峰前部包有雜質(zhì)小峰

改進(jìn)色譜分析條件

柱頭前端過濾篩板部分堵塞

更換色譜柱或低流速反沖色譜柱

色譜柱塌陷

更換色譜柱,檢查色譜柱是否匹配此應(yīng)用條件(壓力或pH值范圍)

溶劑效應(yīng)

1)降低進(jìn)樣量;2)降低樣品溶解液洗脫強(qiáng)度;3)調(diào)換進(jìn)樣閥接口(U3000:調(diào)換進(jìn)樣閥4、5號(hào)位;Vanquish:調(diào)換進(jìn)樣閥1、2號(hào)位)

色譜柱過載

減少進(jìn)樣量或增加柱容量(選用更大內(nèi)徑色譜柱)

拖尾峰

分離不佳,大峰后部包有雜質(zhì)小峰

改進(jìn)色譜分析條件(緩沖鹽的濃度、流動(dòng)相的pH值、洗脫條件等)

樣品與硅烷官能團(tuán)反應(yīng)(常規(guī)C18柱分析堿性化合物)

建議更換封尾色譜柱、特制色譜柱或添加三乙胺等掃尾劑

柱外體積過大

進(jìn)樣器和色譜柱間使用更短、更細(xì)的管路連接

色譜柱過載

減少進(jìn)樣量或增加柱容量(選用更大內(nèi)徑色譜柱)

色譜柱柱效下降

更換色譜柱或保護(hù)柱

檢測(cè)器響應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)

使用推薦值

分叉峰或雙峰

分離不佳

改進(jìn)色譜條件

保護(hù)柱或色譜柱污染

1)更換保護(hù)柱;2)清洗或更換分析柱

柱頭死體積過大

更換合適的管路接頭或更換色譜柱(色譜柱前端塌陷)

溶劑效應(yīng)

1)降低進(jìn)樣量;2)降低樣品溶解液洗脫強(qiáng)度;3)調(diào)換進(jìn)樣閥接口(U3000:調(diào)換進(jìn)樣閥4、5號(hào)位;Vanquish:調(diào)換進(jìn)樣閥1、2號(hào)位)

色譜柱溫度影響

一般發(fā)生在色譜柱內(nèi)徑大于3 mm,并且溫度條件很高的情況下。選用預(yù)加熱來確保色譜柱中流動(dòng)相溫度不會(huì)梯度變化

儀器轉(zhuǎn)子密封磨損

更換轉(zhuǎn)子密封

鬼峰

上一針樣品未全都洗脫

延長(zhǎng)分析時(shí)間或改用梯度洗脫

進(jìn)樣器交叉污染

1)增加洗針程序;2)清洗或更換易污染部件,如針、針座密封

CAD檢測(cè)器被污染

以50%甲醇沖洗

流動(dòng)相、色譜柱或流通池污染

逐一排查原因,采取相應(yīng)措施,如是流通池污染可采用異丙醇以0.2ml/min低流速?zèng)_洗,特別注意水相流動(dòng)相的污染

流通池有氣泡

排除氣泡

不出峰

未進(jìn)樣,或進(jìn)樣量不足

1)保證樣品瓶中樣品量足夠;2)檢查進(jìn)樣類型是否為“Blank"

過高的背景電流/噪音(CAD)

選擇純度較高的流動(dòng)相

樣品容易揮發(fā)(CAD)

查看分析物的蒸氣壓

色譜柱柱效下降

按照說明書對(duì)色譜柱進(jìn)行在生,無效則更換色譜柱

負(fù)峰

不合適的參比波長(zhǎng)(DAD)或RI檢測(cè)器參比池未充分沖洗 

DAD:設(shè)置合適的參比波長(zhǎng)或不使用該功能;RI:增加平衡時(shí)間

樣品溶解液與流動(dòng)相差別太大

使用流動(dòng)相溶解樣品

洗脫物比流動(dòng)相吸收值低

更換波長(zhǎng)或使用低吸收溶劑做流動(dòng)相

錯(cuò)誤的信號(hào)輸出極性

檢查信號(hào)輸出極性,請(qǐng)打400電話

廢液引起(CAD) 

確保PEEK管在廢液瓶中

數(shù)據(jù)處理時(shí)設(shè)置了色譜圖扣除命令

不使用色譜圖扣除的功能

RI檢測(cè)器未關(guān)閉參比池通道(樣品連續(xù)流過樣品池和參比池)

關(guān)閉參比池通道

霧化針污染(CAD)

異丙醇超聲清洗霧化針,無效則更換

毛刺峰

流通池進(jìn)氣泡

流通池出口增加長(zhǎng)度的背壓管,但不能超過流通池的耐壓范圍(注意:FLD流通池耐壓<20bar,不能增加被壓管)

電壓不穩(wěn)或儀器接地不正確

常見于CAD/ECD,打400電話

CAD檢測(cè)器被污染

以50%甲醇沖洗,無改進(jìn)打400電話

峰面積減小

進(jìn)樣器堵塞

逐段排查阻塞點(diǎn),需要時(shí)請(qǐng)打400電話

檢測(cè)器燈能量偏低

更換新燈

檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)置不合理

設(shè)置合理的檢測(cè)波長(zhǎng)

待測(cè)物降解

使用合適的保存條件,如使用含溫控單元的自動(dòng)進(jìn)樣器

CAD霧化溫度過高,半揮發(fā)成份流失

降低霧化溫度

儀器有漏液

檢查漏液位置

峰面積重現(xiàn)性差

自動(dòng)進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子密封/針座密封發(fā)生磨損

更換新的轉(zhuǎn)子密封/針座密封,需要時(shí)請(qǐng)打400電話

進(jìn)樣針的針尖彎曲或堵塞

超聲清洗進(jìn)樣針(注意針尖不要接觸瓶底),無效則更換

進(jìn)樣前針位未處于inject狀態(tài)

進(jìn)樣前,保證針位處于inject狀態(tài)

進(jìn)樣器的注射器進(jìn)氣泡

進(jìn)樣前執(zhí)行灌注注射器命令排除注射器內(nèi)氣泡,需要時(shí)需手動(dòng)排氣泡

自動(dòng)進(jìn)樣器抽樣速度過快

降低進(jìn)樣針的抽樣速度,使抽樣時(shí)間至少3-5秒

自動(dòng)進(jìn)樣器的注射器密封不嚴(yán)/注射器三通閥磨損

更換新的注射器/注射器三通閥,需要時(shí)請(qǐng)打400電話

基線周期性波動(dòng)

泵壓力波動(dòng)

采集壓力通道的信號(hào),尋找壓力波動(dòng)的原因

管路或流通池中有氣泡

流動(dòng)相充分脫氣

基線無規(guī)律波動(dòng)

溫度波動(dòng)

控制好溫度,使用對(duì)溫度較敏感的RI檢測(cè)器時(shí)要尤為注意

流動(dòng)相混合不均勻

1)更換更大的靜態(tài)混合器;2)若為等度分析,可將流動(dòng)相提前混合

檢測(cè)器燈能量過低

更換新燈

流通池被污染

用不同極性溶劑沖洗流通池

流動(dòng)相或色譜柱被污染

更換流動(dòng)相或色譜柱

電壓不穩(wěn)或儀器接地不正確

常見于CAD/ECD,請(qǐng)打400電話

紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)低于溶劑截止波長(zhǎng)

1)選擇合適的流動(dòng)相進(jìn)行分析;2)改變檢測(cè)波長(zhǎng)

其他

蠕動(dòng)泵抽不出溶液

1)彎頭注射器抽出管路氣泡;2)清理擠壓部位;3)更換新的軟管

提示密封圈泄露超限

1)更換密封圈和/或柱塞桿;2)向右擠壓蠕動(dòng)泵杠桿

Vanquish更換流通池時(shí)的注意事項(xiàng)

先關(guān)掉檢測(cè)器模塊的總電源再進(jìn)行更換

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